طريقة تحضير كاجريلينتيد

تكنولوجيا الخلفية

كاجريلينتيد هو نظير الأميلين الأسيلي الجديد طويل المفعول. باعتباره ناهضًا غير انتقائيًا لمستقبل الأميلين (AMYR) ومستقبل بروتين الكالسيتونين G (CTR)، فهو عبارة عن عديد ببتيد دوري يتكون من 38 حمضًا أمينيًا. يحتوي تسلسلها على 38 حمض أميني وزوج من روابط ثاني كبريتيد. يمكن لـCagrilintide أن يقلل بشكل كبير من وزن الجسم وتناول الطعام، وله إمكانات في أبحاث السمنة. الأميلين هو هرمون آخر مرتبط بالجوع والشبع خارج مسار إشارات GLP-1.

 

يمكن أن يقلل كاجريلينتيد من استهلاك الطاقة، وينظم اختيارات وتفضيلات الطعام، ويمارس تأثيرًا منظمًا للجلوكوز من خلال إفرازه مع الأنسولين، ويمنع إطلاق الجلوكاجون بعد الأكل، ويؤخر إفراغ المعدة. وله مزايا واضحة في علاج مرض السكري، والسمنة، ومتلازمة التمثيل الغذائي، وأمراض القلب والأوعية الدموية وغيرها من الجوانب، وله آفاق الطلب والتطبيق على نطاق واسع.

الصيغة التركيبية الكيميائية للكاجريلينتيد

 

 

المعلومات الأساسية

---

الاسم الصيني: 卡格列肽

إنجليزيNآمي：كاجريلينتيد

رقم الشركة：GT-F064

CAS：1415456-99-3

Sequence：γ-Glu-Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Glu-Phe-Leu-Arg-His-Ser-Ser-Asn-As n-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Pro-NH2 (Disulfidebridge:cys4-cys9)

MالجزيئيFormula：C₁₉₄H₃₁₂N₅₄O₅₉S₂

Mالجزيئيوزن：4409.01

 

المواد الخام المستخدمة لكاجريلينتيد

 

الطريق الاصطناعية

---

وفقا لبراءات الاختراع ذات الصلة لCagrilintide، يمكن الحصول على طريقة تركيب Cagrilintide. يتم اختيار الأحماض الأمينية في المواضع 7-8 من تسلسل كاجريلينتيد في صورة ثنائي الببتيد الكاذب Fmoc-Ala-Thr(pro-me-me)-OH، والأحماض الأمينية في المواضع 10-11 من التسلسل في صورة ثنائي الببتيد الكاذب Fmoc-Ala-Thr(pro-me-me)-OH، والأحماض الأمينية في المواضع 21-22 من التسلسل في صورة ثنائي الببتيد الكاذب. معتدلاً-سير-سر(المؤيد لي)-أوه؛ يتم إجراء تفاعلات الاقتران في المواضع المتبقية وفقًا لتسلسل الأحماض الأمينية؛ يتم شق راتنج الببتيد للحصول على كاجريلينتيد الخطي؛ يتم بعد ذلك الحصول على كاجريلينتيد الخام عن طريق تدوير الطور السائل، ويتم الحصول على كاجريلينتيد المكرر من خلال تحضير التنقية، ونقل الملح، والتركيز، والتجفيد. تستخدم هذه الطريقة ثلاثة ثنائيات الببتيدات الكاذبة للاقتران. على الرغم من أنه يحل مشكلة زيادة صعوبة الاقتران الناتجة عن التكثيف المتعدد للراتنج، إلا أنه يزيد من تكاليف الإنتاج، والببتيد المكرر الذي تم الحصول عليه بهذه العملية له نقاء منخفض نسبيًا، مما يفشل في تلبية متطلبات الجودة للمكونات الصيدلانية النشطة.

مخطط تحضير كاجريلينتيد

 

(1)إعدادكاجريلينتيدراتنج الببتيد

خذ 1.5 مليمول من أول حمض أميني محمي و1.5 مليمول من HOBT، ويذوب بكمية مناسبة من DMF ويبرد إلى 0 ~ 15 درجة مئوية؛ خذ 1.5 مليمول أخرى من DIC، وأضفه ببطء إلى محلول DMF للحمض الأميني المحمي تحت التحريك، وحرك التفاعل لمدة 10 دقائق عند 0 ~ 15 درجة مئوية للحصول على محلول حمض أميني محمي منشط، والذي يتم وضعه جانبًا.

 

خذ 0.5 ملمول من الراتنج الأميني (درجة الاستبدال 0.42 ملمول/جم)، قم بتضخمه بمحلول DMF لمدة 60 دقيقة، وقم بإزالة حمايته بمحلول Pip/DMF بنسبة 20% لمدة 30 دقيقة، ثم اغسل وتصفية للحصول على الراتنج المراد تفاعله.

 

أضف محلول الحمض الأميني المحمي الأول المنشط إلى الراتينج المراد تفاعله، وقم بإجراء تفاعل الاقتران عند 25 ~ 35 درجة مئوية لمدة 120 ~ 300 دقيقة، ثم قم بالتصفية والغسل للحصول على الراتنج الذي يحتوي على حمض أميني محمي واحد: Fmoc-Pro-Resin

 

باستخدام نفس الطريقة المذكورة أعلاه، يمكنك الوصول بشكل تسلسلي إلى الأحماض الأمينية المحمية المقابلة من الثاني إلى الثامن والثلاثين أو الأجزاء المذكورة أعلاه:معتدلاً- Thr(tBu)-OH，معتدلاً-آسن (حزب تاي راك تاي) -أوه，معتدلاً-سير (تي بو)-أوه，معتدلاً-جلي-أوه，معتدلاً-فال-أوه，معتدلاً-آسن (حزب تاي راك تاي) -أوه，معتدلاً-Thr(tBu)-OH，معتدلاً-برو-OH·H2O，معتدلاً-برو-OH·H2O，معتدلاً-ليو-OH，معتدلاً-إيل-OH，معتدلاً-برو-OH·H2O，معتدلاً-Phe-OH，معتدلاً-آسن (حزب تاي راك تاي) -أوه，معتدلاً-آسن (حزب تاي راك تاي) -أوه，معتدلاً-سير (تي بو)-أوه，معتدلاً-سير (تي بو)-أوه，معتدلاً-صاحب (حزب تاي راك تاي)-أوه，معتدلاً-Arg(Pbf)-OH，معتدلاً-ليو-OH，معتدلاً-برو-OH·H2O，معتدلاً-غلو (أوتبو)-أوه，معتدلاً-علاء-OH·H2O，معتدلاً-ليو-OH，معتدلاً-Arg(Pbf)-OH，معتدلاً-جلن (حزب تاي راك تاي)-أوه，Fmoc-Ala-Thr(psi(Me,Me)pro)-OH，معتدلاً-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Ala-Thr(psi(Me,Me)pro)-OH，معتدلاً-Thr(tBu)-OH，معتدلاً-آسن (حزب تاي راك تاي) -أوه，معتدلاً-Cys(Trt)-OH，معتدلاً-ليس (بوك)-أوه，معتدلاً-غلو-أوتبو，أحادي ثالثي بوتيل إيكوسانيديوات، ينتج 4.98 جم من راتنج الببتيد كارميغلبتين

 

(2)تحضير الخامكاجريلينتيد الببتيد الخطي

خذ 4.49 جم من راتنج الببتيد carfilzomib، وأضف محلول TFA المختلط، ونسبة المحلول المختلط هي TFA:EDT/Tis/phenol/H₂O = 87.5:2.5:5:2.5:2.5، والجرعة هي 8 مل لكل جرام من الراتنج؛ حرك التفاعل عند 20 ~ 30 درجة مئوية لمدة 3 ساعات، قم بتصفية خليط التفاعل باستخدام قمع رملي، اجمع المرشح، اغسل الراتنج بكمية صغيرة من TFA 3 مرات، اجمع المرشحات، أضف MTBE لهطول الأمطار، اغسل الراسب مع MTBE 3 مرات، وضخه جافًا للحصول على مسحوق أبيض مصفر، وهو 2.08 جم من ببتيد كارفيلزوميب الخطي الخام.

 

(3)تحضير محلول الببتيد الحلقي كاجريلينتيد الخام

خذ 0.50 جرام من الخطي الخامCالببتيد agrilintide، قم بإعداد محلول الببتيد الخطي الخام بتركيز 5.0 مجم / مل، وأضف 5 مل من محلول DMSO قطرة قطرة تحت التحريك، وتفاعل عند 20 ~ 30 درجة مئوية لمدة 20 ساعة للحصول على محلول الببتيد cagrilintide الدوري الخام.

 

(4)تحضير المكررCالببتيد أجريلينتيد

خذ الخامCمحلول الببتيد الحلقي أرجليتيد، ثم قم بتصفيته باستخدام غشاء مرشح مختلط مسامي صغير الحجم بقطر 0.45 ميكرومتر；

 

تنقية وإعداد باستخدام اللوني السائل عالي الأداء، وجمعCكسور أراغليبتين；

 

تم استخدام تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء لتبادل المخزن المؤقت. تم جمع الذروة الرئيسية بعد التبادل العازل وتم اكتشاف نقائها بواسطة تحليل كروماتوجرافي سائل تحليلي. تم تجميع محاليل الذروة الرئيسية بعد التبادل المنظم، وتركيزها تحت ضغط مخفض للحصول على محلول حمض الأسيتيك المائي من الكربوتيد، والذي تم تجفيفه بالتجميد للحصول على 152.18 ملجم من الكربوتيد المكرر بنقاء 99.58٪، والحد الأقصى للشوائب الفردية 0.09٪، والإنتاج الإجمالي 31.87٪، والوزن الجزيئي 4409.0.

 

HPLC رسم بياني

 

مخطط مرض التصلب العصبي المتعدد

 

توضح الأمثلة المذكورة أعلاه أنه، بالمقارنة مع عملية تركيب الاقتران خطوة بخطوة، فإن المنتج الذي تم الحصول عليه بواسطة الطريقة المقدمة بواسطة الاختراع الحالي له نقاء يزيد عن 99.0%، وكل شوائب مفردة أقل من 0.1%، مما يحسن جودة المنتج والإنتاج الإجمالي. العملية بسيطة وسهلة التحكم، وتتمتع بدرجة عالية من التصنيع، ولها قيمة عملية واسعة وآفاق التطبيق.

اتصل بنا

---

هل تبحث عن Cagrilintide لبرنامجك؟ Cosperpharm هو شريكك الموثوق به فيما يتعلق بمعايير المواد الوسيطة والشوائب. تواصل معنا اليوم، فنحن على استعداد لدعم مشروعك بدءًا من البحث والتطوير وحتى الإنتاج التجاري.

 

الهاتف: +86-18986204913

 

هاتف: +86-027-83338163

 

البريد الإلكتروني: info@cosperpharma.com