2'-O-ميثيل-rA(N-Bz)فوسفوراميديت

2′-O-Methyl-rA(N-Bz) فوسفوراميديت هو مونومر فوسفوراميت معدل يمكن استخدامه لتخليق قليل النوكليوتيد. يمنح تعديل 2'-O-ميثيل مقاومة نووية كبيرة لأليغنوكليوتيدات مع الحفاظ على خصائص الترابط الهيدروجيني لثنائيات RNA/RNA بشكل أكثر إخلاصًا من هجينة DNA/RNA. في تطبيقات تداخل الحمض النووي الريبي (RNAi)، يتم دمج 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) الفوسفوراميت في كثير من الأحيان في خيوط المعنى والمضادة للدوبلكس الصغيرة المتداخلة من الحمض النووي الريبي (siRNA) لتعزيز استقرار المصل وتقليل التأثيرات غير المستهدفة دون المساس بنشاط RNAi. 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) يعمل الفوسفوراميديت أيضًا بمثابة لبنة بناء مهمة في التخليق الكيميائي لأليغنوكليوتيدات الحمض النووي الريبي (RNA) التي تحتوي على تعديلات 2′-O-ميثيلادينوسين الخاصة بالموقع؛ تسمح المجموعات الواقية (DMT عند 5 ′، Bz عند N6، CE فوسفوراميديت عند 3 ′) بالتجميع التدريجي لخيوط RNA بدقة عالية والتحكم في مُركِّبات DNA / RNA الآلية. بعيدًا عن علاجات الحمض النووي الريبي (RNA)، وجد فوسفوراميديت 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) تطبيقًا في تخليق نماذج الحمض النووي الريبي (RNA) المتفرعة بالفوسفات لدراسة بنيات الحمض النووي الريبي (RNA) غير العادية وفي تحضير تحقيقات أليغنوكليوتيد الفلورسنت المستقرة حراريًا.

معلمات المنتج

لماذا كوسبيرفارم؟ – مميزاتنا التنافسية

مزايا المنتج

1. تعديل 2'-O-ميثيل لمقاومة النيوكلياز والاستقرار الحراري

يعد تعديل 2′-O-methyl في موضع الريبوز 2′ أحد التعديلات الكيميائية الأكثر التحقق من صحتها على نطاق واسع في علاجات قليل النوكليوتيد. تظهر أليغنوكليوتيدات تحتوي على 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) Phosphoramidite مقاومة معززة بشكل ملحوظ للنوكليازات الداخلية والخارجية مقارنة بالحمض النووي الريبي (RNA) غير المعدل، مع تحسين الثبات الحراري لثنائيات RNA/RNA (زيادة Tm) دون المساس بخصوصية اقتران قاعدة Watson-Crick. تم نشر هذا التعديل بنجاح في أدوية قليل النوكليوتيد المعتمدة من إدارة الغذاء والدواء والعديد من الأدوية المرشحة للمرحلة السريرية.

2. حماية N6-البنزويل للتوليف عالي الدقة

تمنع مجموعة الحماية البنزويل (Bz) الموجودة على الأمين الحلقي N6 من قاعدة الأدينين التفاعلات الجانبية غير المرغوب فيها أثناء دورة اقتران الفوسفوراميديت، مثل أحداث التفرع أو إنهاء السلسلة الناتجة عن إزالة البيورين أو الأسيلة. تتم إزالة مجموعة Bz بشكل نظيف في ظل ظروف إزالة حماية قليل النوكليوتيد القياسية (الأمونيا المركزة، 55 درجة مئوية، 8-16 ساعة، أو AMA)، مما يؤدي إلى قاعدة الأدينين الأصلية دون منتجات ثانوية يمكن اكتشافها.

3. التنظيم المسبق لتكوين السكر C3′-Endo

يؤدي استبدال 2′-O-methyl إلى تثبيت سكر الريبوز في شكل C3′-endo (شمال) - وهو نفس الشكل الذي يتبناه RNA في الثنائيات ذات الشكل A. يقلل هذا التنظيم المسبق المطابق من عقوبة الإنتروبيا عند التهجين لأهداف الحمض النووي الريبي (RNA) التكميلية، مما يؤدي إلى تقارب ربط أعلى (أعلى Tm) لأليغنوكليوتيدات معدلة 2′-O-ميثيل نسبة إلى الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي (RNA) غير المعدل بنفس التسلسل.

4. توافق مجموعة الحماية القياسية للتوليف الآلي

يحمل فوسفوراميديت 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) نفس مجموعات الحماية 5′-O-DMT وN6-Bz المستخدمة في فسفوراميديت RNA القياسي، إلى جانب فسفورميديت β-سيانو إيثيل (CE) عند الموضع 3′. يضمن هذا التصميم التكامل السلس في سير عمل مركب DNA/RNA الآلي الحالي دون الحاجة إلى بروتوكولات إزالة الحماية المتخصصة أو شروط الاقتران المعدلة.

5. فائدة علاجية واسعة النطاق عبر منصات قليل النوكليوتيد

يتم استخدام 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) الفوسفوراميديت عبر منصات علاجية متعددة قليل النوكليوتيد: siRNA (تعديلات حبلا المعنى والمضاد للحساس)، وأليغنوكليوتيدات مضادة للحساس (ASOs) لإسكات الجينات، والأبتامرات للتوصيل المستهدف والتطبيقات التشخيصية، وتحقيقات الحمض النووي الريبي المعدلة للتشخيص الجزيئي. يتم أيضًا استخدام تعديل 2′-O-methyl على نطاق واسع في دليل CRISPR-Cas لتعزيز الاستقرار وكفاءة التحرير.

سيناريوهات التطبيق

1. التطوير العلاجي لسيرنا

يتم استخدام 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) فوسفوراميديت لإدخال تعديلات 2′-O-ميثيلادينوسين في المعنى و/أو خيوط مضادة للحساسية لدوبلكسات RNA الصغيرة المسببة للتداخل (siRNA) لتعزيز استقرار المصل، وتقليل التأثيرات غير المستهدفة بوساطة آلية RNAi (على سبيل المثال، تحميل حبلا الركاب)، وتقليل التحفيز المناعي (تنشيط TLR7/8). يعد تعديل 2′-O-methyl مكونًا قياسيًا للعديد من منصات siRNA المتقدمة سريريًا.

2. تصنيع قليل النوكليوتيد المضاد للتحسس (ASO).

تم دمج 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) الفوسفوراميديت على نطاق واسع في أليغنوكليوتيدات مضادة للتحسس لتطبيقات إسكات الجينات. يمنح تعديل 2′-O-methyl مقاومة نوكلياز لـ ASOs في السوائل البيولوجية ويعزز تقارب الارتباط لأهداف RNA التكميلية دون تعطيل آليات الانقسام بوساطة RNase H (عند وضعها في تصميمات فجوة 2′-O-methyl/2′-deoxy).

3. التركيب الكيميائي لأليغنوكليوتيد الحمض النووي الريبي (RNA).

2′-O-Methyl-rA(N-Bz) يعمل الفوسفوراميديت ككتلة بناء للتخليق الكيميائي في الطور الصلب لأليغنوكليوتيدات الحمض النووي الريبي (RNA) التي تحتوي على بقايا 2′-O-ميثيلادينوسين الخاصة بالموقع. تتوافق مجموعات الحماية (5′-O-DMT، N6-Bz، CEphosphoramidite) مع دورات تخليق الحمض النووي الريبي (RNA) القياسية وشروط إزالة الحماية (NH₃، 55 درجة مئوية، 8-16 ساعة، أو AMA)، مما يسمح بالتكامل السلس في سير عمل التوليف الراسخ.

4. تصميم مسبار قليل النوكليوتيد الفلوري

تعمل تعديلات 2′-O-ميثيل على تحسين الاستقرار الحراري لتحقيقات الفلورسنت (على سبيل المثال، المنارات الجزيئية، تحقيقات TaqMan) المستخدمة في PCR في الوقت الحقيقي والتهجين في الموقع. يتيح 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) Phosphoramidite إدخال تعديلات التثبيت في تسلسلات المسبار، مما يزيد من نسبة الإشارة إلى الضوضاء ويتيح اكتشافًا أكثر قوة لأهداف الحمض النووي الريبي (RNA) منخفضة الوفرة.

5. تطوير الأبتمرات المتضمنة للأبتاميرات المعدلة كيميائيًا

تظهر نيوكليوتيدات 2′-O-ميثيل مقاومة محسنة للنوكلياز، ممتدة في نصف عمر الجسم الحي، وألفة ربط معززة للهدف مقارنة بأبتامرات الحمض النووي الريبي (RNA) غير المعدلة. 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) Phosphoramidite هو لبنة أساسية لتوليد مكتبات أبتمرات معدلة 2′-O-ميثيل عبر تخليق الطور الصلب.

6. تعديل دليل كريسبر-كاس RNA (gRNA).

يمكن لتعديلات 2′-O-ميثيل الموضوعة في مواضع محددة في الحمض النووي الريبوزي CRISPR-Cas أن تعزز الاستقرار، وتقلل من المناعة، وتحسن كفاءة التحرير في الخلايا وفي الجسم الحي. يتيح 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) Phosphoramidite إدخال بقايا 2′-O-methyladenosine في موقع محدد إلى gRNAs المركبة كيميائيًا.

7. أبحاث الحمض النووي الريبوزي المتفرعة بالفوسفات

يستخدم الباحثون الذين يدرسون بنيات الحمض النووي الريبي (RNA) غير العادية، مثل الحمض النووي الريبي (RNA) المتفرع من الفوسفات، فوسفوراميت 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) لتحضير أليغنوكليوتيدات نموذجية تحتوي على مجموعة 2′-OH حرة واحدة للتحقيق في الثبات المائي لروابط الفوسفوتريستر المتفرعة تحت الظروف الفسيولوجية.

8. دراسات الاستقرار الحراري للأليغنوكليوتيدات المعدلة

2′-O-Methyl-rA(N-Bz) يستخدم الفوسفوراميديت في الدراسات المنهجية للثبات الحراري (Tm) لثنائيات قليل النوكليوتيد المعدلة، بما في ذلك توصيف التأثيرات الموضعية لتعديلات 2′-O-ميثيل على درجة حرارة ذوبان المزدوج والديناميكا الحرارية التهجين.

9. تصنيع قليل النوكليوتيدات في المرحلة الصلبة

تطوير العملية يستخدم كيميائيو العمليات والمتخصصون في تخليق قليل النوكليوتيد فوسفوراميديت 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) لتحسين ظروف الاقتران وبروتوكولات إزالة الحماية وطرق التنقية للتصنيع على نطاق واسع لعلاجات الحمض النووي المعدلة 2′-O-ميثيل. توفر Cosperpharm بيانات تحليلية خاصة بالدفعة لدعم التحقق من صحة العملية وتوسيع نطاق الأنشطة.

10. تطوير الطريقة التحليلية لمراقبة جودة قليل النوكليوتيد

يستخدم 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) الفوسفوراميت كمعيار مرجعي في تطوير طرق HPLC وLC-MS لقياس محتوى النيوكليوزيد المعدل في المواد الدوائية قليل النوكليوتيد ومنتجات الأدوية، وكذلك لتحديد الشوائب المرتبطة بالتوليف (على سبيل المثال، إزالة DMT غير الكاملة، ومنتجات إزالة البيورة، والمنتجات الثانوية لأكسدة الفوسفيت).

اتصل بنا

هل تحتاج إلى 2′-O-Methyl-rA(N-Bz) Phosphoramidite الموثوق به وعالي النقاء لمشروعك القادم لتخليق قليل النوكليوتيد؟ فريق Cosperpharm على استعداد للمساعدة في مواصفات المنتج، واحتياجات التوثيق، وحلول سلسلة التوريد المصممة خصيصًا لتطبيقك.