نظرة عامة وإعداد خلات Icatibant

ملخص

خلات إيكاتيبانت هو علاج خاص بمرض الورم الوعائي الوعائي الوعائي (HAE) الذي طورته شركة شاير، والذي حصل على موافقة إدارة الغذاء والدواء الأمريكية في 25 أغسطس 2011، لإدارة النوبات الحادة من الوذمة الوعائية الوراثية لدى البالغين الذين تتراوح أعمارهم بين 18 عامًا فما فوق. وهو أيضًا الدواء الثالث الذي وافقت عليه إدارة الغذاء والدواء الأمريكية لعلاج نوبات الوذمة الوعائية الوراثية. تمتلك خلات Icatibant بنية مشابهة لـ d-decapeptide الشبيه بالبراديكينين ولكنها تحتوي على خمسة أحماض أمينية غير مشتقة من البروتين. إنه يعمل كمضاد تنافسي انتقائي قوي لمستقبلات البراديكينين من النوع 2 (B2)، مما يخفف التورم الموضعي والالتهاب والألم المرتبط بنوبات الوذمة الوعائية الوراثية عن طريق تثبيط تأثيرات البراديكينين. يمثل الوذمة الوعائية الوراثية (HAE) واحدًا فقط من المؤشرات المحتملة العديدة التي يمكن وصفها للـ icatibant؛ وتشمل التطبيقات المحتملة الأخرى الربو وتليف الكبد وأنواع أخرى من الوذمة الوعائية. ونتيجة لذلك، يُظهر خلات إيكاتيبانت قيمة علاجية كبيرة وآفاق سوقية واسعة.

صيغة التركيب الكيميائيخلات إيكاتيبانت

EssentialIمعلومات

الاسم الصيني:醋酸艾替班特

الاسم الانكليزي: خلات إيكاتيبانت

معرف الشركة：GT-F005

CAS：138614-30-9；130308-48-4

Sرقم اريال：H-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH   

Mالصيغة الجزيئية：C59H89N19O13S

Mالوزن الجزيئي：1304.52

خلات إيكاتيبانت طيف مرض التصلب العصبي المتعدد

الطريق الاصطناعية

1: إعداد راتنج Fmoc-Arg(Pbf)-CTC

أضف 11.1 جم من راتنج 2-كلوروترفينيل ميثيل كلوريد بمعدل استبدال 0.9 مليمول/جم إلى عمود التفاعل في المرحلة الصلبة، متبوعًا بإضافة راتنج DMF المتضخم لمدة 30 دقيقة. أضف 3.50μL من DIPEA إلى 12.98 جم من Fmoc-Arg(Pbf)-OH وتنشيطه لمدة 5 دقائق؛ ثم أضف الراتنج المتضخم DMF واترك الخليط يصل إلى التوازن بعد 10 دقائق. أضف 3.50 أخرىμL من DIPEA، يتفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 45 دقيقة، ثم يُغلق أخيرًا بالميثانول لمدة 20 دقيقة. تبخر خليط التفاعل، واغسل ثلاث مرات باستخدام DMF، وثلاث مرات باستخدام DCM، ثم انقبض ثلاث مرات بالميثانول لمدة 3 دقائق، و5 دقائق، و8 دقائق على التوالي، مما ينتج عنه راتنج Fmoc-Arg(Pbf)-CTC بمعدل استبدال مقيس يبلغ 0.5 مليمول/جرام.

2：اقتران ل معتدلاً-منظمة المؤتمر الإسلامي-أوه

قم بوزن 10 مليمول من راتنج Fmoc-Arg (Pbf)-CTC وأضفه إلى مفاعل الطور الصلب، وقم بتضخيمه في DMF لمدة 0.5 ساعة، ثم قم بإزالة حماية Fmoc مرتين باستخدام محلول DBLK بنسبة 20% لمدة 10 دقائق و5 دقائق على التوالي؛ بعد الغسيل، يترافق مع Fmoc-Oic-OH. قم بإذابة 11.73 جم من Fmoc-Oic-OH، و4.9 جم من HOBt، و6.1 مل من DIC في DCM (يمكن إضافة كمية صغيرة من DMF للإذابة)، وتنشيط الخليط في حمام ماء جليدي لمدة 7 دقائق، ثم نقله إلى مفاعل الطور الصلب والتفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1–2 ساعة. يتم تحديد نقطة نهاية التفاعل بواسطة طريقة الإندانترون. عند الانتهاء، قم باستنشاق خليط التفاعل، واغسل باستخدام DMF، وأزل حماية Fmoc مرتين باستخدام محلول DBLK 20% لمدة 10 دقائق و5 دقائق على التوالي، واغسل مرة أخرى، واستعد للاقتران مع الأحماض الأمينية التالية.

3：اقتران ل معتدلاً-D-سيتي-أوه

حل 11.91 جرام من Fmoc-D-Cit-OH، و5.00 جرام من HOAt، و11.4 جرام من HATU في DCM (مع إضافة كمية صغيرة من DMF للإذابة). أضف 3.87 جم من DIPEA تحت حمام الماء المثلج وقم بتنشيطه لمدة 7 دقائق؛ ثم ينقل الخليط إلى مفاعل الطور الصلب ويتفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1–ساعاتين. يتم تحديد اكتمال التفاعل بواسطة طريقة الإنديول. بعد التفاعل، قم بإزالة خليط التفاعل، واغسل باستخدام DMF، وقم بإزالة حماية Fmoc باستخدام محلول DBLK بنسبة 20%. بعد الغسيل، استعد للاقتران مع الحمض الأميني التالي.

4：اقتران ل معتدلاً-سر (تبو)-أوه

حل 11.49 جرام من Fmoc-Ser(tBu)-OH، 5.00 جرام من HOAt، و6.1 مل من مدينة دبي للإنترنت في DCM (مع إضافة كمية صغيرة من DMF للإذابة). بعد التنشيط تحت حمام الماء المثلج لمدة 7 دقائق، ينقل الخليط إلى مفاعل الطور الصلب ويتفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1 دقيقة.–ساعاتين؛ يتم تحديد اكتمال التفاعل بواسطة طريقة الإنديول. عند الانتهاء، قم بإزالة خليط التفاعل، واغسل باستخدام DMF، ثم قم بإزالة حماية Fmoc باستخدام محلول DBLK بنسبة 20%، متبوعًا بالغسيل قبل الشروع في الاقتران بالحمض الأميني التالي.

5：اقتران ل معتدلاً-ثي-أوه

حل 11.79 جرام من Fmoc-Thi-OH، و5.00 جرام من HOBt، و11.37 جرام من HBTU في DCM (مع إضافة كمية صغيرة من DMF للإذابة). أضف 3.87 جم من DIPEA تحت حمام الماء المثلج وقم بتنشيطه لمدة 7 دقائق؛ ثم انقل الخليط إلى مفاعل الطور الصلب واترك التفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1–ساعاتين. يتم تحديد اكتمال التفاعل بواسطة طريقة الإنديول. بعد التفاعل، قم بإزالة خليط التفاعل، واغسل باستخدام DMF، وقم بإزالة حماية Fmoc باستخدام محلول DBLK بنسبة 20%. بعد الغسيل، استعد للاقتران مع الحمض الأميني التالي.

6：اقتران ل معتدلاً-جلاي-أوه

حل 8.91 جم من Fmoc-Gly-OH، و5.00 جم من HOBt، و9.63 جم من TBTU في DCM (مع إضافة كمية صغيرة من DMF للإذابة). أضف 3.63 جم من TMP تحت حمام الماء المثلج وقم بتنشيطه لمدة 7 دقائق؛ ثم انقل الخليط إلى مفاعل الطور الصلب واترك التفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1–ساعاتين. يتم تحديد اكتمال التفاعل بواسطة طريقة indanone. بعد التفاعل، قم بإزالة خليط التفاعل، واغسل باستخدام DMF، وقم بإزالة حماية Fmoc باستخدام محلول DBLK بنسبة 20%. بعد الغسيل، استعد للاقتران مع الحمض الأميني التالي.

7：اقتران ل  معتدلاً-الهيب (تبو)-أوه

حل 12.27 جرام من معتدلاً-الهيب (تبو)–أوه، 5.00 جم من HOAt، و9.66 جم من TATU في DCM (مع إضافة كمية صغيرة من DMF للإذابة). أضف 3.63 جم من TMP تحت حمام الماء المثلج وقم بتنشيطه لمدة 7 دقائق؛ ثم ينقل الخليط إلى مفاعل الطور الصلب ويتفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1–ساعاتين. يتم تحديد نقطة نهاية التفاعل بواسطة طريقة الإنديول. بعد الانتهاء، قم بإزالة خليط التفاعل، واغسل باستخدام DMF، وقم بإزالة حماية Fmoc باستخدام محلول DBLK بنسبة 20%. بعد الغسيل، استعد للاقتران مع الحمض الأميني التالي.

8：اقتران ل معتدلاً-برو-أوه

حل 10.11 جم من Fmoc-Pro-OH، و5.00 جم من HOAt، و11.4 جم من HATU في DCM (مع إضافة كمية صغيرة من DMF للإذابة). أضف 3.87 جم من DIPEA تحت حمام الماء المثلج وقم بتنشيطه لمدة 7 دقائق؛ ثم ينقل الخليط إلى مفاعل الطور الصلب ويتفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1–ساعاتين. يتم تحديد نقطة نهاية التفاعل بواسطة طريقة الإنديول. عند الانتهاء، قم بإزالة خليط التفاعل، واغسل باستخدام DMF، وقم بإزالة حماية Fmoc باستخدام 20% DBLK. بعد الغسيل، استعد للاقتران بالحمض الأميني التالي.

9：اقتران ل معتدلاً-أرج (ببف)-أوه

حل 19.44 جم من Fmoc-Arg(Pbf)-OH، و5.00 جم من HOAt، و11.4 جم من HATU في DCM (مع إضافة كمية صغيرة من DMF للإذابة). أضف 3.87 جم من DIPEA تحت حمام الماء المثلج وقم بتنشيطه لمدة 7 دقائق؛ ثم ينقل الخليط إلى مفاعل الطور الصلب ويتفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1–ساعاتين. يتم تحديد اكتمال التفاعل بواسطة طريقة الإنديول. بعد التفاعل، قم بإزالة خليط التفاعل، واغسل باستخدام DMF، وقم بإزالة حماية Fmoc باستخدام محلول DBLK بنسبة 20%. بعد الغسيل، استعد للاقتران مع الحمض الأميني التالي.

10：اقتران ل معتدلاً-D-أرج (ببف)-أوه

حل 19.44 جم من Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH، و5.00 جم من HOAt، و11.4 جم من HATU في DCM (مع إضافة كمية صغيرة من DMF للإذابة). أضف 3.87 جم من DIPEA تحت حمام الماء المثلج وقم بتنشيطه لمدة 7 دقائق؛ ثم ينقل الخليط إلى مفاعل الطور الصلب ويتفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1–ساعاتين. يتم تحديد نقطة نهاية التفاعل بواسطة طريقة الإنديولون. بعد الانتهاء، قم بإزالة خليط التفاعل، واغسل باستخدام DMF، ثم استخدم 20% DBLK لإزالة حماية Fmoc. أغسل ثلاث مرات مع DMF، ثلاث مرات مع DCM، وثلاث مرات مع الميثانول للانكماش (لمدة 3 دقائق، 5 دقائق، و 8 دقائق على التوالي)، تليها التجفيف بالفراغ للحصول على راتنج خلات الببتيد etibant.

HPLC اللوني من خلات Icatibant

11：الانحلال الحراري للراتنج من خلات Icatibant

قم بإعداد 200 مل من كاشف التحلل الذي يحتوي على 190 مل من حمض ثلاثي فلورو أسيتيك، و6 مل ثلاثي إيزوبروبيلسيلان، و4 مل من الماء، وقم بتبريده مسبقًا في الثلاجة لمدة 30 دقيقة. أضف 20.0 جرام من راتنج خلات الببتيد etibant إلى قارورة مستديرة القاع سعة 500 مل، ثم أضف كاشف التحلل المحضر 200 مل إلى الراتنج أثناء التحريك تحت حمام جليدي وتحت تدفق النيتروجين. بعد 30 دقيقة من التفاعل، قم بإزالة حمام الثلج واستمر في التفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين. تصفية الراتنج وجمع الترشيح. اغسل الراتينج بكمية صغيرة من حمض ثلاثي فلورو أسيتيك، وقم بتصفيته، واجمع المرشحات. تدريجيا إضافة الترشيح إلى 20 لتر من الأثير المثلج؛ أشكال راسب أبيض. أجهزة الطرد المركزي عند 3000 دورة في الدقيقة لجمع الراسب، وغسل خمس مرات مع الأثير المثلج، وتجفيفها تحت ضغط منخفض للحصول على 10.3 غرام من الببتيد الخام بنقاء HPLC> 90%.